| Titre : | Evaluation de l’effet préventif des extraits de quelques plantes endémiques Thymélaea hirsuta et de Haloxylon artéculatum Boiss chez les rats intoxiqués au Nickel. Etude biochimique, histologique et neurocomportementale |
| Auteurs : | Grele Karima, Auteur ; ADLI Djallel Eddine Houari, Directeur de thèse ; SlIMANI Miloud, Directeur de thèse |
| Type de document : | texte imprimé |
| Editeur : | [S.l.] : Université de Saida– Dr. Moulay Tahar Faculté des sciences, 2021/2022 |
| Format : | 186 p / 29 CM |
| Accompagnement : | CD |
| Langues: | Français |
| Langues originales: | Français |
| Catégories : | |
| Mots-clés: | Nickel ; Haloxylon artéculatum Boiss ; Thymélaea hirsuta ; l’huile essentielle Cerveau ; Foie ; Rein |
| Résumé : |
L’ objectif de cette étude est d’évaluer d’une part, les modifications induites par le Nickel
selon différentes approches expérimentales : neurocomportementales, biochimiques et histologique chez des jeunes rats d’autre part, l’efficacité de l’huile essentielle de Haloxylon artéculatum (HEHa) et Thymélaea hirsuta (HETh) à rétablir ou non les effets néfastes du métal étudié par une injection intrapéritonéale de 0,1 ml HEHa et ou HETh/kg/j durant une période de 21 jours. L’extraction de HE de Haloxylon artéculatum et HE de Thymélaea hirsuta par hydrodistillation nous a permis d’obtenir une HEHa avec un rendement de 0,11% et HETh avec un rendement de 0,31%. La caractérisation de ces l’huiles essentielles par CPG-SM indique que les composants majeurs de l’huile HEHa sont : Thymol (14,19%), Alphaterpinène (11,02), ß -E-Ocimène (9,64), 1,8-Cineole (8,69), Oleuropine (5,17%), Linalol (5,12%), Delta -3- Carène (4,12). L’activité antioxydante de l’HEHa confectionnée in vitro a montré un pouvoir de piégeage du radical libre DPPH avec une IC 50 de l’ordre de 15,06 ± 1,45 µg/ml. Même constat pour la Themylaea hirusta (HETh) qui présente une activité antioxydante (IC50= 7,83±0,307 µg/ml). L’exposition chronique au Nickel à une concentration de 2g/l des rats, a permis d’observer une baisse du poids corporels et cérébral comparé à ceux des témoins . Les résultats relatifs aux tests de comportement plus précisément ceux de la dépression (froced swimming test), de l’anxiété, le test du compartiment sombre/ clair, Open field et de la mémoire spatiale, dévoilent clairement que l’intoxication au Ni provoque des troubles neurocomportementaux se traduisant par une hypoactivité locomotrice et une réduction du comportement d’exploration du milieu qui reflète l’instauration d’un état des stress, anxiété et dépression. Cette intoxication au Ni a révélé également une perturbation des différents paramètres biochimiques notamment les biomarqueurs rénaux, hépatiques et lipidique. En effet, l’étude histologique a montrée des lésions très marquées au niveau des différents tissus : rénales et hépatiques. Par ailleurs, l’administration de HEHa et HETh ont permis d’enregistrer un regain du poids corporels et cérébral des rats comparé aux rats intoxiqués. De plus, l'utilisation des différentes techniques relatives aux tests de comportements : le test de la nage forcée (FST), le le test du compartiment sombre/ clair (dark and light), test de la piscine de Morris et l’Open field dévoilent clairement que HEHa et HETh corrigent l’état dépressif, l’anxiété et hypoactivité locomotrice respectivement observé chez les rats exposer au Ni. Les résultats des dosages biochimiques rénaux (urée, créatinine) et hépatique (TGO, TGP, Bilirubine totale), cholestérol totale et triglycéride montrent une correction des valeurs suite à l’administration de HEHa et HETh comparativement a avec ceux des animaux intoxiqués. L’analyse du statut antioxydant au niveau érythrocytaire indique que HEHa et HETh a rétablit l’activité des différentes enzymes antioxydants (SOD, CAT, GSH-Px) chez les rats intoxiqués et traités par HEHa ou HETh. En effets, l’étude histologique entreprise a illustrée une nette amélioration de l’architecture tissulaire principalement rénale et hépatique chez les rats intoxiqué et traité par HEHa ou HETh ce qui justifie la grande importance du Haloxylon artéculatum et Thymélaea hirsuta dans la médecine traditionnelle et ces vertus thérapeutiques. |
| Note de contenu : |
Introduction…………………………………………………………………………………
Chapitre 1 : Le Nickel ………………………………………………………………………. 1.1. Introduction……………………………………………………………………………. 1.2. L’identité ……………………………………………………………………………….. 1.3. Les propriétés physico-chimiques 1.4. Le nickel dans tous ses états ……………………………………………………………. 1.5. Utilisation du Nickel ………………………………………………………………….. 1.6. Sources d’exposition…………………………………………………………………….. 1.7. Toxicocinétique …………………………………………………………………………. 1.7.1. L’absorption …………………………………………………………………………… 1.7.2. Distribution……………………………………………………………………………… 1.7.3. Métabolisme …………………………………………………………………………… 1.7.4. Excrétion……………………………………………………………………………… 1.8. Toxicité du nickel ………………………………………………………………………… 1.8.1. Toxicité aigüe ………………………………………………………………………… 1.8.1.1. Chez l’homme………………………………………………………………………… 1.8.1.2. Chez l’animal ………………………………………………………………………… 1.8.2. Toxicité subchronique ………………………………………………………………… 1.8.2.1. Chez l’homme………………………………………………………………………… 1.8.2.2. Chez l’animal ………………………………………………………………………… 1.8.3. Toxicité chronique ……………………………………………………………………… 1.8.3.1. Chez l’homme………………………………………………………………………… 1.8.3.2. Chez l’animal ………………………………………………………………………… 1.9. Effet du nickel sur l’organisme ………………………………………………………… 1.9.1. Effet du nickel sur les reins …………………………………………………………… 1.9.2. Effet du nickel sur le système hépatique ……………………………………………… 1.9.3. Effet du nickel sur l’appareil respiratoire ……………………………………………… 1.9.4. Effet du nickel sur le système endocrinien …………………………………………… 1.9.5. Effets cardiovasculaires ……………………………………………………………… 1.9. 6. Effets gastro-intestinaux ……………………………………………………………… 1.9.7. Effets cutanés ………………………………………………………………………… 1.9.8. Effet du nickel sur les paramètres érythropoiétiques ……………………………….. 1.9.9. Effet du nickel sur le système immunitaire …………………………………………… 1.9.10. Effets génotoxiques ………………………………………………………………… 1.9.11. Effets cancérogènes …………………………………………………………………… 1.9.12. Effets neurogènes …………………………………………………………………… 1.9.13. Effet du nickel sur la reproduction …………………………………………………… 1.9.13.1. Effets du nickel sur la reproduction chez le male …………………………………… 1.9.13.2. Effets du nickel sur la reproduction chez la femelle ……………………………… 1.9.14. Le nickel induit un stress oxydatif ………………………………………………. 201.9.14.1. Altération de l’ADN……………………………………………………………… 1.9.14.2. Oxydation des protéines…………………………………………………………… 1.9.14.3. Peroxydation lipidique……………………………………………………………… 1.9.14.4. Défense antioxydants contre la toxicité du nickel ……………………………… 1.10. Transfère transplacentaire du nickel …………………………………………………… Chapitre 2 La phytothérapie et les huiles essentielles……………………………………..20 2. 1.La phytothérapie ………………………………………………………………………… 2.1.1 Définition ……………………………………………………………………………… 2.1.2. Différents types de la phytothérapie ………………………………………………… 2.1.2.1. Aromathérapie ……………………………………………………………………… 2.1.2.2. Gemmothérapie ……………………………………………………………………. 2.1.2.3. Herboristerie ………………………………………………………………………….. 2.1..2.4. Homéopathie ………………………………………………………………………… 2.1.2.5. Phytothérapie pharmaceutique ……………………………………………………… 2.1.3. Les plantes médicinales……………………………………………………………… 2.1.3.1.Généralités……………………………………………………………………………… 2.1.3.2. Définition………………………………………………………………………… 2.1.3.3. les métabolites secondaires des plantes ………………………………………………. 2.1.3.3.1. Classification des métabolites secondaires ………………………………………… 2.1.3.3.1. 1. Les composés phénoliques …………………………………………………….. 2.1.3.3.1.1.1. Structure et catégories des composés phénoliques ………………………….. 2.1.3.3.1.1.2. Classification des polyphénols ………………………………………………… 2.1.3.3.1.2. Les alcaloïdes…………………………………………………………………… 2.1.3.3.1.2.1. Propriétés des alcaloïdes ………………………………………………………. 2.1.3.3.1.2. 2. Structure des alcaloïdes …………………………………………………….. 2.1.3.3.1.2.3. Classification des alcaloïdes …………………………………………………… 2.1.3.3.1.2. 4. Rôle des alcaloïdes …………………………………………………………… 2.1.3.3.1.2.5. Les dérivés des alcaloïdes …………………………………………………….. 2.1.3.3.1.3. Les terpenoïdes …………………………………………………………………. 2.1.3.3.1.3. 1. Structure des terpenoïdes …………………………………………………….. 2.1.3.3.1.3. 2. Classification des terpenoïdes …………………………………………………. 2.1.3.3.1.3. 2. Classification des terpenoïdes ………………………………………………. 2.2. Les huiles essentielles ………………………………………………………….………… 2.2.1. Généralités ……………………………………………………………………………24 2.2.2. Répartition ……………………………………………………………………………39 2.2.3. Biosynthèse et composition chimique ……………………………………………39 2.2.4. Propriétés physico-chimiques des huiles essentielles ……………………………… 2.2.5. Classification des huiles essentielles………………………………………………40 2.2.6. Principaux domaines d’application………………………………………………… 2.2.6.1. Aromathérapie……………………………………………………………………… 2.2.6.2. Agro-alimentaire……………………………………………………………………. 2.2.6.3. Cosmétologie et parfumerie………………………………………………………… 2.2.6.4. Pharmacie………………………………………………………………………… 2.2.7.Toxicité des huiles essentielles………………………………………………………. 422.2.8.Les techniques d’extraction des huiles essentielles ……………………………….43 2.2.8.1. La distillation …………………………………………………………………..44 2.4.1.8.1.1. L'hydrodistillation (water distillation) ……………………………………….44 2.2.8.1.2. La distillation par entraînement à la vapeur d'eau (steam istillation) …………45 2.2.8.1.3.L'hydrodiffusion ………………………………………………………………..45 2.2.8.2. Extraction par micro-ondes ……………………………………………………..46 2.2.8.3.L’extraction au CO2 supercritique ……………………………………………….47 2.2.8.4. Extraction par les solvants et les graisses ………………………………………..48 2.2.8.5. Expression à froid ………………………………………………………………… 2.2.9. Conditions de conservation et de stockage………………………………………….. 2.2.10. Analyses des huiles essentielles et critères de qualité…………………………… 2.2.10.1. La chromatographie en phase gazeuse (CPG)…………………………………. 2.2.10.2. La chromatographique en phase gazeuse couplée à la spectroscopie de masse GC/MS………………………………………………………………………….48 2.2.11. L’activité antioxydante des huiles essentielles:…………………………………..50 2.2.11.1. Méthodes de détermination de l’activité Antioxydante………………………50 2.2.11.1.1. Le test d’ABTS…………………………………………………………… 2.2.11.1.2. Le test du DPPH………………………………………………………. 2.2.11.1.3. Le test FRAP……………………………………………………………………50 Chapitre 3 Les plantes étudiées…………………………………………………………….. 3. Les plantes étudiées…………………………………………………………………….. 3.1. Haloxylon articulatum Boiss …………………………………………………………… 3.1.2.Synonymes ……………………………………………………………………………… 3.1.3.Systématique …………………………………………………………………………… 3.1.4. Noms vernaculaires …………………………………………………………………… 3.1.5. Description botanique ………………………………………………………………….. 3.1.6. Aire de répartition géographique ……………………………………………………… 3.1.7. Utilisation en médecine traditionnelle ……………………………………………… 3.1.8.Composition et propriétés biologiques ………………………………………………… 3.1.9. Activité biologique …………………………………………………………………… 3.1.10. Phytochimie …………………………………………………………………………… 3.1.11.Activités Antioxydante……………………………………………………………….. 3.1.12.Toxicité ………………………………………………………………………………..3.2.Thymelaea hirsuta…………………………………………………………………53 3.2.1. Généralité………………………………………………………………………………62 3.2.2. Description botanique………………………………………………………………… 3.2.3. Biologie et Ecologie…………………………………………………………………….63 3.2.4. Classification……………………………………………………………………. 3.2.4.1 .Classification botanique……………………………………………………………. 653.2.4.2. Classification phylogénétique………………………………………………………. 3.2.5. Composition chimique et utilisation………………………………………………….. 3.2.6. Activités Antioxydante…………………………………………………………………. 3.2.7. Propriétés et usages thérapeutiques………………………………………………….. 3.2.8. Toxicité de la plante………………………………………………………………….. Partie pratique ……………………………………………………………………………… Materiel et methode………………………………………………………………………… 1. Objectif …………………………………………………………………………………… 2. Matériel végétale …………………………………………………………………………… 2.1. Source et conservation …………………………………………………………………… 2.2. Préparation des extraits …………………………………………………………………… 2.2.1. Préparation de l'extrait aqueux (EA) …………………………………………………… 2.2.2. Préparation de l'extrait eau–méthanol (EM) ……………………………………………66 2.2.3. Extraction des huiles essentielles par l'hydrodistillation ……………………………… 2.2.4. Determination de la composition chimique de l’huile essentielle par CPG/SM … 2.2.5. Etude phytochimique (Analyse qualitative) …………………………………………… 2.2.6. Evaluation de l’activité antioxydant…………………………………………………… 2.2.6.1. Piégeage du radical libre DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil) ……………………. 2.2.7.Preparation de solution injectable……………………………………………………….. 3. Matériels chimiques ……………………………………………………………………. 4. Matériel biologique (Animaux d'expérimentation) ………………………………………… 4.1. Origine des animaux et conditions d'hébergement ……………………………………… 4.2. Répartition des groupes ………………………………………………………………… 4.3.Evaluation du poids corporel ……………………………………………………………… 4.4. Évaluation comportementale …………………………………………………………… 4.4.1. L’épreuve de la nage forcée (Forced Swimming Test) ……………………………….. 4.4.2. Test de l’open field …………………………………………………………………… 4.4.3. La Piscine de Morris ………………………………………………………………… 4.4.4. Le test du compartiment sombre/ clair ……………………………………………… 4.5. Sacrifice des rats et préparation des échantillons sanguins et tissulaires …………………72 4.6. Préparation des érythrocytes……………………………………………………………… 4.6.1. Description des méthodes utilisées pour la mesure des marqueurs du stress oxydant86 4.6.1.1. Le superoxyde dismutase SOD ………………………………….………………… 4.6.1.2. Catalase (CAT)…………………………………………………………………….. 4.6.1.3. Glutathion peroxydase (GSH-Px) …………………………………………………. 4.7. Dosages biochimiques ………………………………………………………………….86 4.7.1. Détermination de taux sanguin de nickel ………………………………………………. 4.7.2. Dosage du glucose ……………………………………………………………………. 4.7.3. Evaluation des marqueurs du fonctionnement rénal ……………………………….. 4.7.3.1. Dosage de l’urée …………………………………………………………………… 4.7.3.2. Dosage de créatinine ……………………………………………………………… 4.7.4. Evaluation des marqueurs du fonctionnement hépatique ……………………………… 4.7.4.1. Dosage des transaminases (TGO-TGP) ……………………………………………… 4.7.4.2. Dosage de la bilirubine ……………………………………………………………… 4.7.5. Evaluation des paramètres lipidiques……………………………………………… 4.7.5.1. Dosage des triglycérides………………………………………………………………86 884.7.5.2. Dosage de Cholestérol……………………………………………………………… 4.7.5.3. Dosage de l’albumine ……………………………………………………………… 4.8. Etude histologique des organes…………………………………………………………… 4.8.1. Prélèvement…………………………………………………………………………… 4.8.2. Fixation…………………………………………………………………………………. 4.8.3. Prélèvements des sections tissulaires……………………………………………….. 4.8.4. Déshydratation ………………………………………………………………………… 4.8.5. Imprégnation …………………………………………………………………………… 4.8.6. Inclusion ……………………………………………………………………………… 4.8.7. Mise en bloc …………………………………………………………………………… 4.8.8. Confection des coupes histologiques ………………………………………………… 4.8.9. Déparaffinage ………………………………………………………………………… 4.8.10. Réhydratation ………………………………………………………………………… 4.8.11. La coloration ………………………………………………………………………… 4.8.12. Montage et observation microscopique ……………………………………………… 5. Expression et analyse statistique des résultats ……………………………………………… Résultat et interprétation …………………………………………………………………… 1.1. En extrait aqueux et eau-méthanol ……………………………………………………… 1. Détermination du rendement et composition chimique……………………………………………. 1.2. Le rendement en l’huile essentielle ……………………………………………………… 94 1.3. Détermination de la composition chimique de l’huile essentielle (Haloxylon articulatum) par CPG/SM ……………………………………………………………………………….. 1.4. Etude phytochimique (Analyse qualitative) ……………………………………………… 1.5. Evaluation de l’activité antioxydant ……………………………………………………… 1.6.1. Piégeage du radical libre DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazil) …………………… 2. Effet du Nickel sur le poids corporel et le poids des organes ……………………………… 3. Evaluation comportementale ……………………………………………………………… 3.1. L’épreuve de la nage forcée (Forced Swimming Test) ………………………………….. 3.2. Test de l’open field……………………………………………………………………… 3.3. La Piscine de Morris …………………………………………………………………. 3.3.1. Le probe test …………………………………………………………………………… 3.3.2. Test visible ……………………………………………………………………………… 3.4. Le test du compartiment sombre/ clair ……………………………………………….. 4. Evaluation du pouvoir antioxydant de HEHa et HETh in vivo …………………………… 4.1. L’activité de la SOD …………………………………………………………………… 4.2. L’activité de la CAT …………………………………………………………………… 4.3. L’activité du GPx ………………………………………………………………………… 5. Dosage biochimique ……………………………………………………………………… 5.1. Détermination du taux de Nickel sanguin ………………………………………… 5.2. Dosage de glycémie ……………………………………………………………………… 5.3. Dosage des biomarqueurs de la fonction rénale ………………………………………… 5.4. Exploration de la fonction hépatique …………………………………………………. 5.5. Evaluation des paramètres lipidiques…………………………………………………… 6. Effet du Nickel et HEHa et HETh sur l’architecture structurale des organes ………………………………………………………………………………………… 6.1. Effet du Nickel et HEHa et HETh sur l’architecture structurale du rein ……………… 6.2. L’effet du Nickel et HEHa et HETh sur l’architecture structurale du foie ……………… Discussion…………………………………………………………………………………… 1. Rendement et composition chimique……………………………………………………… 1202. Etude phytochimique ……………………………………………………………………. 3. Evaluation de l’activité antioxydant ……………………………………………………… 4. L’effet du traitement par l’huile essentielle de T.hirsuta et H.articulatum Boiss et du nickel sur le poids corporel et le poids des organes ……………………………………………… 5. Effet du nickel sur le comportement cognitif chez le rat …………………………………… 6. Impact du Ni et HE D T.hirsuta et H.articulatum Boiss sur le stress oxydant érythrocytaire 7. Les paramètres biochimiques……………………………………………………………… 7.1. La détermination du taux sanguin de nickel ……………………………………………… 7.2. Effets du Ni et HE D T.hirsuta et H.articulatum Boiss sur le bilan glucidique…. 7.3. Effets du Ni et HE D T.hirsuta et H.articulatum Boiss sur les biomarqueurs de la fonction rénal……………………………………………………………………………… 7.4. Effets du Ni et HE D T.hirsuta et H.articulatum Boiss sur les biomarqueurs de la fonction hépatique……………………………………………………………………… 7.5. Effets du Ni et HE D T.hirsuta et H.articulatum Boiss sur le bilan lipidique…………… 8. Effet du Ni et HE de (H.artuculatum, T.hirsuta) sur l’architecture des organes …………… 8.1. Effet Ni et HE de H.artuculatum et T.hirsuta sur l’architecture du rein ……………… 8.2. Effet Ni et HE de H.artuculatum et T.hirsuta sur l’architecture du foie ……………… Conclusion …………………………………………………………………………………… Références bibliographique ……………………………………………………………… Annexe ……………………………………………………………………………………….. |
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