| Titre : | Méthodologie scientifique et techniques d’étude du vivant (MSTEV) |
| Auteurs : | CHALANE FATIHA, Auteur |
| Type de document : | texte imprimé |
| Editeur : | [S.l.] : [S.l.] : Dr. Moulay Tahar Université Saida, Faculté des Sciences Naturelles et de la Vie, 2020/2021 |
| Format : | 51 P / 29 CM |
| Accompagnement : | CD |
| Langues: | Français |
| Langues originales: | Français |
| Catégories : | |
| Mots-clés: | Technique du microscope ; cellulaires |
| Résumé : |
Cette matière permet aux étudiants d’avoir des notions sur les
méthodes appliquées à l’étude des vivants : méthodes Cytologiques, méthodes d'étude de la composition biochimique des cellules et les techniques d’approche aux vivants. |
| Note de contenu : |
I. Méthodes d’étude de la morphologie des cellules ................................................. 1
1. La microscopie .......................................................................................................... 1 MICROSCOPIE OPTIQUE ...................................................................................... 2 La microscopie en lumière directe .............................................................................. 2 La microscopie en contraste de phase ............................................................... 5 Technique du microscope à fond noir (microscopie par transmission en champ sombre).......................................................................................................................... 8 Technique du microscope à lumière polarisée ................................................ 10 Technique de la microscopie à fluorescence ................................................. 12 Les microscopes électroniques ................................................................................. 15 Microscope électronique à transmission ....................................................... 15 Principe du fonctionnement .............................................................................................. 15 Caractéristiques des électrons .................................................................................15 Les composants de MET ...................................................................................................16 Préparation des coupes cellulaires ultrafines .................................................................. 17 Etapes de fonctionnement de MET .................................................................................. 18 Le Microscope Electronique à Balayage (MEB) .......................................... 20 Préparation des échantillons ................................................................................... 20 Détecteur .................................................................................................................... 22 II. Méthodes d’étude de la composition biochimique des cellules ........................ 22 1. Matériels cellulaires .............................................................................................. 22 Différents types de cellules ................................................................................... 22 Composition chimique de la cellule ..................................................................... 23 L’eau dans la cellule ....................................................................................... 24 Les substances organiques ............................................................................. 24 Sels minéraux .................................................................................................24 Les préparations d’étude .......................................................................................... 25 Cellule entière ou coupes des cellules ............................................................................... 25 a) Cellules entières .................................................................................................... 25 b) Coupes de cellules ................................................................................................. 25 Séparation de différents organites : le fractionnement cellulaire ..................................25Broyats cellulaires = homogénats cellulaires .................................................................... 26 a. Techniques mécaniques ......................................................................................... 26 a. 1. Le broyage mécanique ...................................................................................... 26 a. 2. La bombe à disruption.......................................................................................27 a. 3. La Presse de French ........................................................................................... 27 a. 4. La sonication (Ultrasons) ..................................................................................28 a. 5. La congélation-décongélation ............................................................................ 28 b. Les Techniques chimiques et enzymatiques ......................................................... 28 b. 1. La lyse ou choc osmotique .................................................................................. 28 b. 2. Modification de la force ionique ou du pH ........................................................ 29 b. 3. Lyse enzymatique ............................................................................................... 29 Fractions cellulaires ...................................................................................... 29 a. Principe de la séparation des organites cellulaires ...................................... 29 b. La centrifugation..............................................................................................30 Principe ...................................................................................................................... 30 Types d’ultracentrifugation ............................................................................... 31 L'ultracentrifugation différentielle .......................................................................... 31 L’ultracentrifugation en gradient de densité........................................................... 32 2. Les méthodes .......................................................................................................... 33 Les méthodes d'analyse et de dosage biochimiques ............................................... 33 Extraction des protéines ................................................................................. 33 La purification ................................................................................................ 33 L’électrophorèse ....................................................................................................... 33 Dosage des protéines (exemple de la technique de biuret) .......................... 34 Les méthodes cytochimiques .............................................................................. 36 Localisation de polysaccharides : réaction à l'APS (Acide Périodique - réactif de Schiff) .......................................................................................................................... 36 Localisation d'acides nucléiques : test de Brachet ....................................... 37 Immun cytologie/ immunologie technique (technique de localisation d’antigènes Ag) .......................................................................................................... 38 III. Techniques de génie génétique (séquençage d’ADN) ...................................... 391. Préparation des acides nucléiques (extraction et purification) ........................... 39 2. Amplification in vitro des acides nucléiques PCR (Polymerase Chain Reaction) et RT-PCR (Reverse Transcription PCR) ................................................................ 39 PCR ...................................................................................................................... 39 RT-PCR ...............................................................................................................40 3. Séquençage d’ADN ................................................................................................ 40 Automatisation du séquençage ........................................................................... 42 |
Exemplaires (1)
| Code-barres | Cote | Support | Localisation | Section | Disponibilité |
|---|---|---|---|---|---|
| BUC-P 000275 | SNV-P00022 | Livre | Bibliothèque PMB Services | Albums | Consultation sur place Exclu du prêt |
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