| Titre : | Contribution à l’évaluation de l’activité préventive de la plante médicinale Petroselinum crispium contre la toxicité du cuivre chez le rat wistar. Etudes immuno-hématologique et histologique |
| Auteurs : | BOUDALIA Wassila, Auteur ; Berroukche Abdelkrim, Directeur de thèse |
| Type de document : | texte imprimé |
| Editeur : | [S.l.] : Université de Saida– Dr. Moulay Tahar Faculté des sciences, 2019/2020 |
| Format : | 125 p / 29 CM |
| Accompagnement : | CD |
| Langues: | Français |
| Langues originales: | Français |
| Catégories : | |
| Mots-clés: | Cuivre ; Petroselinum crispum ; Toxicité ; Huiles essentielles ; Extrait hydro- éthanolique ; Chélateur |
| Résumé : |
Le cuivre (Cu), un métal de transition essentiel et oligoélément, agit comme un cofacteur dans
les réactions catalysées par des enzymes. Mais en excès, il peut être toxique pour les systèmes biologiques. La plante médicinale Petroselinum crispum, ou persil, a un impact positif sur la santé humaine grâce à sa richesse en métabolites secondaires bioactifs (flavonoïdes, polyphénols, terpènes, alcaloïdes …). Cette étude tend à évaluer les effets préventifs de l'huile (HE.P) et l’extrait hydro-éthanolique (EEP) du persil sur les perturbations immuno- hématologique, biochimique et histologique induites par le sulfate de cuivre chez le rat Wistar. Une étude in vivo a été menée, pendant 8 semaines, sur 42 rats mâles répartis en 6 groupes. Les animaux ont été exposés, pendant 60 jours, par voie orale à une concentration de 2000 ppm de sulfate de cuivre penta-hydraté (CuSO4, 5H2O) et en même temps traités, dans les mêmes conditions, avec une dose de 0.42 ml/Kg HE.P ou 2 g /Kg d’extrait de Petroselinum crispum. HE.P présentait un rendement de 5.96 %, des propriétés organoleptiques et physico-chimiques conformes aux normes de commercialisation des huiles essentielles établies par les différentes pharmacopées. La composition de HE.P, déterminée par CPG/SM ou CCM, montrait la présence de nombreux composés tel que pinènes , furano–coumarines , dillapiol , apiol , allyl- tétraméthoxybenzène ,β-Phellandrène , bis(2-éthylhéxyl) phtalate , myristicine , trans-β- ocimène , β-myrcène, γ-terpinène. L’analyse du EEP par LC/SM a identifié les métabolites secondaires tels que génistèine , kaempférol ,quercétine , apigénine 4’ diméthyle –éther , acide caféique, tyrosol , acide hexadécanoïque.Le dosage des polyphénols totaux et des flavonoïdes de l’extrait hydro-éthanolique révélait des teneurs élevées en ces composés par rapport à l’huile essentielle. L’évaluation in vitro de l’activité anti-oxydante des HE.P et EEP a été réalisée par le piégeage du radical libre DPPH• et le pouvoir réducteur des ions ferriques (FRAP). La meilleure activité par rapport à l’antioxydant standard (acide ascorbique), était obtenue par l’huile essentielle suivie par l’extrait hydro-éthanolique. Huile essentielle et l’extrait hydro-éthanolique de Petroselinum crispum ont été soumis à un criblage pour évaluer l’activité antimicrobienne. HE.P a révélé une forte activité antibactérienne vis-à-vis de Salmonella typhimurium, Escherichia coli et Klebsiella pneumonie comparativement à EEP . RésuméContribution à l’évaluation de l’activité préventive de la plante médicinale Petroselinum crispum contre la toxicité du cuivre chez le rat wistar. Etudes immuno-hématologique et histologique Par contre, Ils se sont révélés inactifs vis-à-vis citrobacterfrendii , enterobactercloacae et Staphylococcus aureus. Une huile essentielle, source de mono-terpènes, présentait des activités antibactériennes potentielles. L’administration de cuivre aux rats, a induit un dysfonctionnement hépatique, rénal, cérébral et splénique se traduisant par une augmentation du taux sérique des marqueurs biochimiques (glycémie, ASAT, ALAT, créatinine, LDL, triglycérides et bilirubine) et une diminution du taux de l’urée, cholestérol total et HDL. Une diminution de marqueurs hématologiques a été constatée (hématies, lymphocytes, hémoglobine, hématocrite, plaquettes, TGMH et CCMH). L’exposition au Cu a induit des nécroses au niveau des tissus hépatique, rénal, cérébral et splénique. Administration de 0.42 ml / Kg de HE.P ou 2 g / Kg de EEP a induit une nette amélioration du statut physiologique des animaux et la correction des altérations immuno-hématologique, biochimique et histologique. Ces résultats montraient in vivo d’une part que Petroselinum crispum, importante source de principes actifs, était dotée d’un pouvoir préventif contre les perturbations induites par la toxicité du cuivre et d’une autre part le persil était considéré comme un chélateur spécifique pouvant substituer les médicaments. |
| Note de contenu : |
Introduction
1 Chapitre I : Toxicité du Cuivre et pathologies associées I.1. Fonction biologique3 I.2. Cuivre : Un métal pré-védique utilisé en médecine5 I.3. Recommandations alimentaires pour le cuivre5 I.4. Absorption, distribution et métabolisme du cuivre6 I.4.1. Absorption et distribution du cuivre6 I.4.2. Métabolisme du cuivre7 I.5.Régulation centrale et stockage du cuivre : Troubles liés à la toxicité de cuivre8 I.6. Rôle du cuivre dans la santé humaine10 I.6.1. Pathologies associées a un excès de cuivre10 I.6.1.2. Maladie de Wilson (MW)10 I.6.1.3.Troubles non wilsoniens (toxicose du cuivre)11 I.6.1.4. Maladie d'Alzheimer11 Table des matièresContribution à l’évaluation de l’activité préventive de la plante médicinale Petroselinum crispum contre la toxicité du cuivre chez le rat wistar. Etudes immuno-hématologique et histologique I.6.1.5. Maladies à prions12 I.6.1.6. Maladie de Parkinson(MP)13 I.6.1.7. Diabète13 I.6.1.8. Cancer14 I.7. Chélatothérapie15 I.8.Utilisation des antioxydants15 Chapitre II: Persil ( Petroselinum crispum) et ses propriétés thérapeutiques II.1. Histoire du persil en phytothérapie17 II.2. Origine et répartition géographique18 II.3. La description botanique du persil18 II.4. Classification et systématique19 II.5. Les utilisations ethno -médicinales19 II.6. Analyses phyto-chimiques20 II.6.1. Criblage phyto-chimique21 II.6.2. Identification chromatographique et spectroscopique21 II.6.3. Composition nutritionnelle25 II.7. Propriétés physico-chimiques des huiles essentielles de Petroselinum crispum26 II.7.1. Propriétés physiques26 II.7.1.1. Caractéristiques organoleptiques26 II.7.1.2. Détermination de PH27 II.7.1.3. Densité relative27 II.7.1.4. Pouvoir rotatoire27 II.7.1.5. Miscibilité à l’éthanol27 II.7.2. Propriétés chimiques27 II.7.2.1. Indice d’acide27 II.7.2.2. Indice d’ester27 II.8. Propriétés thérapeutiques de persil (Petroselinum crispum)27 II.8.1. Activité anti-oxydante27 Table des matièresContribution à l’évaluation de l’activité préventive de la plante médicinale Petroselinum crispum contre la toxicité du cuivre chez le rat wistar. Etudes immuno-hématologique et histologique II.8.2. Activité antidiabétique et hépato-protecteur27 II.8.3. Activité anticancéreuse28 II.8.4. Activité immuno-modulatrice28 II.8.5. Activité analgésique, anti-inflammatoire et antipyrétique28 II.8.6. Action anti-allergique28 II.8.7. Activité spasmolytique29 II.8.8. Activité neuro-protecteur29 II.8.9. Activité néphroprotecteur29 II.8.10. Activité anti –plaquettaire et effet hypotenseur29 II.8.11. Activité antimicrobienne et cytotoxique30 II.8.12. Activité antifongique et antimycosique30 II.8.13. Effet protecteur pour l’appareil digestif30 II.8.14. Activité anti-ostéoporotique et œstrogénique30 II.9. Les apports de Petroselinum crispum dans la chélatothérapie32 Partie expérimentale Chapitre III : Matériels et méthodes III.1. Matériel végétal33 III.2. Situation géographique de la région33 III.3.Etude de la structure sécrétrice des huiles essentielles34 III.4. Extraction par dispositif d’hydro-distillation( HD)34 III.5.Détermination des indices physico chimiques des HE .s extraites de Petroselinum crispum (Ouis, 2015)37 III.5.1. Propriétés physique37 III.5.1.1. Détermination de PH37 III.5.1.2. Densité relative à 20°C37 III.5.1.3. Miscibilité à l’éthanol38 Table des matièresContribution à l’évaluation de l’activité préventive de la plante médicinale Petroselinum crispum contre la toxicité du cuivre chez le rat wistar. Etudes immuno-hématologique et histologique III.5.1.4. Point de congélation38 III.5.1.5. Pouvoir rotatoire38 III.5.2.Propriétés chimiques39 III.5.2.1. L’indice d’acide39 II.5.2.2. Indice d’ester (Ie)39 III.6. Analyses phyto-chimiques et biologiques40 III.6.1.Analyses phyto-chimiques41 III.6.1.1. Criblage phyto-chimique41 III.6.1.2. Analyses colorimétriques par spectrophotométrie (UV-visible)44 III.6.1.2.1. Détermination de la teneur en poly-phénols totaux44 III.6.1.2.2. Détermination de la teneur en flavonoïdes totaux45 III.6.1.3. Identification chimique de persil par chromatographie sur couche mince (CCM) 46 III.6.1.4. Identification chimique de Petroselinum crispum par CPG / SM-IE46 III.6.1.5. Identification chimique de Petroselinum crispum par LC/SM47 III.6.2. Evaluation in vitro des activités biologiques48 III.6.2.1. Le potentiel antioxydant de nos extraits de Petroselinum crispum48 III.6.2.2. Evaluation du potentiel antimicrobien51 III.6.3. Evaluation in vivo des activités biologiques55 III.6.3.1.Produit chimique (Le sulfate de cuivre penta-hydraté)55 III.6.3.2. Répartition des groupes, prélèvements sanguins et d’organe56 III.6.3.3. Dosage des paramètres biochimiques et hématologiques58 III.6.3.4. Etude histologique58 Analyse statistique60 Chapitre IV : Résultats et discussions IV.1.Etude de la structure sécrétrice des huiles essentielles61 IV.2. Extraction des huiles essentielles par la technique d’hydro-distillation61 IV.2.1.Calcul du taux d’humidité de persil61 IV.2.2. Calcul des rendements62 Table des matièresContribution à l’évaluation de l’activité préventive de la plante médicinale Petroselinum crispum contre la toxicité du cuivre chez le rat wistar. Etudes immuno-hématologique et histologique IV.2.3. Influence du broyage des graines sur le rendement en huiles essentielles63 IV.3. Détermination des indices physico-chimiques des HE.s extraites63 IV.3.1. Propriétés physiques63 IV.3.1.1.Caractéristiques organoleptiques63 IV.3.2. Propriétés chimiques65 IV.3.2.1. Indice d’acide66 IV.3.2.2. Indice d’ester66 IV.3.2.3. Indice de saponification66 IV.4. Analyses phyto-chimiques et biologiques66 IV.4.1. Analyses phyto-chimiques66 IV.4.1.1. Résultats des caractérisations phyto-chimiques66 IV.4.1.2. Rendement en extrait sec de la plante70 IV.4.1.3. Analyses colorimétriques par spectrophotométrie (UV-visible)71 IV.4.1.3.1. Détermination de la teneur en poly-phénols totaux71 IV.4.1.3.2. Détermination de la teneur en flavonoïdes73 IV.4.1.3.3. Caractérisation phyto-chimique par chromatographie sur couche mince (CCM)73 IV.4.1.3.4. Caractérisation phyto-chimique par chromatographique (CPG/SM)77 IV.4.1.3.4.1. Comparaison entre la composition chimique de l’HE de persil avec des essences étrangère82 IV.4.1.3.5. Analyse chromatographique par LC-SM84 IV.4.1. Analyse biologiques86 IV.4.1.1. Evaluation in vitro des activités biologiques de l’extrait brut (EEP) et l’huile essentielle de Petroselinum crispum (HE.P)86 IV.4.1.1.1. Effet antioxydant de l’huile essentielle de Petroselinum crispum (piégeage du radical DPPH•)86 IV.4.1.1.2. Effet antioxydant de l’extrait hydro- alcoolique de Petroselinum crispum (Piégeage du radical DPPH•)86 Table des matièresContribution à l’évaluation de l’activité préventive de la plante médicinale Petroselinum crispum contre la toxicité du cuivre chez le rat wistar. Etudes immuno-hématologique et histologique IV.4.1.1.3. Détermination de l’index CI5088 IV.4.1.1.4. Activité anti-oxydante de l’huile essentielle et l’extrait brut par réducteur de fer (FRAP)98 IV.4.1.1.5. Evaluation de l’activité antimicrobienne92 IV.4.2.2. Evaluation in vivo des activités biologiques de l’extrait brut (EEP) et l’huile essentielle de Petroselinum crispum (HE.P)96 IV.4.2.2.1. Observation de signes comportementaux96 IV.4.2.2.2. Influence des traitements sur les variations des paramètres hématologiques97 IV.4.2.2.3.Influence du traitement sur les variations du poids corporel et pondérales des organes103 IV.4.2.2.4. Influence du traitement sur les variations des paramètres biochimiques sériques107 IV.4.2.2.5. Etude histologique115 IV.4.2.2.6. Effet de cuivre, l’huile essentielle (HE.P) et l’extrait hydro-éthanolique (EEP) sur les paramètres lipidiques122 IV.4.2.2.7. Effet de sulfate de cuivre sur la fonction hépatique et l’action hépato- protectrice de l’huile essentielle et l’extrait de Petroselinum crispum123 IV.4.2.2.8. Effet de sulfate de cuivre sur la fonction rénale et l’action néphroprotectrice de l’huile essentielle et l’extrait de Petroselinum crispum125 Conclusion et perspectives Références bibliographiques Annexes Publication Table des matièr |
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