| Titre : | Contribution à l’étude de l’effet bénéfique de l’extrait aqueux de Pimpinella Anisum L. (anis vert) chez les rats Wistar exposés subchroniquement à deux pesticides (imidaclopride et formaldéhyde) utilisés en Algérie |
| Auteurs : | TAIBI Narimane, Auteur ; KAHLOULA Khaled, Directeur de thèse |
| Type de document : | texte imprimé |
| Editeur : | [S.l.] : Université de Saida– Dr. Moulay Tahar Faculté des sciences, 2019/2020 |
| Format : | 151 p / 29 CM |
| Accompagnement : | CD |
| Langues: | Français |
| Langues originales: | Français |
| Catégories : | |
| Mots-clés: | Imidaclopride ; Formaldéhyde ; Pimpinilla anisum ; Mémoire ; Apprentissage |
| Résumé : |
Aujourd’hui, les pesticides sont soupçonnés de présenter un risque pour la santé humaine et
pour l’environnement. L’imidaclopride (IMD) est un insecticide qui appartient à la famille des néonicotinoïdes et parmi les pesticides les plus utilisés au monde en agriculture. Le formaldéhyde (FA) est un produit chimique organique largement utilisé dans le monde entier et a des effets dangereux pour l’homme et son environnement. Extrêmement courant, ce produit est utilisé comme désinfectant ou biocide. Pimpinella anisum L. est l'une des plantes médicinales. Son l’huile essentielle et ses extraits ont des diverses activités biologiques. Dans cette étude nous nous sommes intéressés à évaluer d’un coté, l’effet toxique de deux pesticides, l’imidaclopride et le formaldéhyde, sur un modèle animal ; les rats Wistar pendant 28 jours ; 30 jours respectivement, et d’un autre coté d’estimer l’effet thérapeutique de l’extrait aqueux de Pimpinella anisum (EAP) contre cette toxicité. En se basant sur quatre approches : neurocomportementale, biochimique, hématologique et histologique. L’exposition à ces pesticides entraine un retard de la croissance pondérale, ainsi qu’une perturbation du développement hépatique et rénal. Nos résultats montrent également que les deux pesticides utilisés (IMD et FA) provoquent une neurotoxicité qui apparut à travers, les changements neurocomportementaux qui se sont manifestés par une dépression, une anxiété, une perturbation de l’apprentissage et la mémoire spatiale, ainsi qu’une dégénérescence des cellules cérébrales chez les animaux exposés aux pesticides par rapport aux animaux intoxiqués traités par l’EAP et animaux témoins. L’étude biochimique a mis en évidence une perturbation des paramètres hépatiques qui se traduit par une élévation significative (P 0.001) du taux sérique de l’ASAT, ALAT et PAL ainsi que les paramètres rénaux à savoir l’urée (P au FA par rapport aux rats témoins respectivement. Il ressort à travers l’hémogramme, une réduction significative du taux sérique des thrombocytes (P 0.001), hémoglobine (P par l’IMD et par le formaldéhyde comparativement aux rats témoins respectivement. Les résultats montrent aussi une augmentation significative (P chez les animaux exposés à l’IMD ainsi que sa diminution significative (P animaux exposés au FA par rapport aux animaux témoins. L’étude histologique a montrée une atteinte cellulaire ainsi que des modifications structurales et des altérations au niveau des différents tissus chez les lots intoxiqués par les deux pesticides comparativement aux lots témoins et intoxiqués traités. Par ailleurs, le traitement par l’extrait aqueux de Pimpinella anisum durant deux semaines nous a permis d’enregistrer un effet correcteur sur l’altération des différents paramètres récents, en minimisant la toxicité induite par l’imidaclopride et le formaldéhyde. À partir de nos résultats, on peut conclure que l’extrait aqueux de Pimpinella anisum présente un effet bénéfique face à la toxicité induite par les deux pesticides. |
| Note de contenu : |
Introduction ......................................................................................................................... 2
Partie bibliographique Chapitre I : Pimpinella anisum L. 1.1.Définition ................................................................................................................ 7 1.2.Description botanique ............................................................................................... 7 1.2.1. Feuilles et fleurs ........................................................................................................ 8 1.2.2. Fruit .......................................................................................................................... 8 1.2.3. Tige et Racine ........................................................................................................... 9 1.3.Taxonomie ................................................................................................................. 9 1.4.Nomenclature ........................................................................................................... 9 1.5.Origine et distribution ................................................................................................ 9 1.6.Composition d’anis vert .......................................................................................... 10 1.7.Intérêt de l’utilisation de l’anis vert et son huile essentielle ..................................... 10 1.7.1. Importance culinaire................................................................................................. 10 1.7.2. Importance en médecine .......................................................................................... 11 1.7.3. Effets sur le système digestif ................................................................................... 11 1.7.4. Effets sur le système nerveux .................................................................................. 11 1.7.5. Effet sur le système respiratoire ............................................................................... 11 1.7.6. Effet sur le le système reproducteur féminin ........................................................... 12 1.7.7. Autres ...................................................................................................................... 12 2. Les huiles essentielles .................................................................................................... 13 2.1. Définition ................................................................................................................... 13 2.2. Biosynthèse et localisation des huiles essentielles ...................................................... 13 3. Les composés aromatiques ............................................................................................. 15 4. Critères déterminants la qualité des huiles essentielles ................................................... 15 5. Choix de la méthode d’extraction ................................................................................... 16 6. Méthodes d’obtention des huiles essentielles et les extraits des plantes ........................... 16 6.1. Méthodes d’extraction Traditionnelles ........................................................................ 16 6.1.1. Infusion ................................................................................................................... 16 6.1.2. Décoction ................................................................................................................ 166.1.3. Macération ................................................................................................................ 17 7. Distillation ................................................................................................................. 17 7.1. Hydrodistillation ........................................................................................................ 17 7.2.Distillation par entraînement à la vapeur ................................................................... 18 7.3.Méthodes d’extraction Modernes .............................................................................. 18 8.Toxicité des huiles essentielles ..................................................................................... 19 9.L’huile essentielle de Pimpinella anisum L ................................................................... 19 9.1.Caractéristiques ........................................................................................................ 19 9.2. Composition chimique ............................................................................................... 19 9.3. Le composant majeur et ses applications ................................................................... 20 9.4. Toxicité, effets indésirables ....................................................................................... 21 Chapitre II : Pesticides 1.1. Historique .................................................................................................................. 23 1.2. Définition ................................................................................................................. 23 1.3. Classifications ........................................................................................................... 23 1.3.1. Classification biologique ........................................................................................... 24 1.3.1.2. Les insecticides ...................................................................................................... 24 1.3.1.3. Les fongicides ....................................................................................................... 24 1.3.1.4. Les herbicides ....................................................................................................... 24 1.3.2. Classification chimique ............................................................................................. 25 1.3.2.1. Les pesticides organiques ....................................................................................... 25 1.3.2.2. Les pesticides inorganiques .................................................................................... 25 1.4. Modes d’expositions aux pesticides ............................................................................. 25 1.4.1. Exposition professionnelle .......................................................................................... 26 1.4.2. Exposition non professionnelle .................................................................................. 27 1.5. Effet toxique ................................................................................................................ 27 1.5.1. Intoxication aigue ..................................................................................................... 27 1.5.2. Intoxication chronique .............................................................................................. 27 1.6. Devenir des pesticides dans l’environnement ............................................................. 27 2. Néonicotinoïdes ........................................................................................................... 28 2.1. Généralités ................................................................................................................... 28 2.2. Classification ............................................................................................................... 292.3. Imidaclopride ............................................................................................................. 30 2.3.1. Définition .................................................................................................................. 30 2.3.2. Les propriétés physicochimiques ............................................................................... 31 2.3.3. Mode d’action ........................................................................................................... 32 2.3.3.1.Le récepteur nicotinique à l’acétylcholine (nAChR) ............................................... 32 2.3.3.2.La synapse cholinergique nicotinique .................................................................... 33 2.3.4. La toxico-cinétique .................................................................................................... 34 2.3.4.1. Voie orale ............................................................................................................. 34 a. Absorption .......................................................................................................... 34 b. Métabolisation .................................................................................................... 34 c. Distribution et élimination .................................................................................. 35 2.3.4.2. Voie cutanée ......................................................................................................... 35 2.3.5. Effet toxique ............................................................................................................. 36 2.3.5.1. Toxicité aigue ....................................................................................................... 36 2.3.5.2..... Toxicité chronique ................................................................................................. 36 2.3.6. Les effets toxiques de l’imidaclopride ........................................................................ 37 a. Effets sur la reproduction .................................................................................... 37 b. Effets mutagéniques ........................................................................................... 38 c. Effets tératogènes .............................................................................................. 38 d. Effets immunotoxiques ....................................................................................... 39 e. Effet neuro-immunologique ............................................................................... 39 f. Effets cancérogènes ............................................................................................ 39 g. Effets neurotoxique ............................................................................................. 40 2.3.7. Domaines d’utilisation ............................................................................................... 40 2.4. Formaldéhyde .......................................................................................................... 41 2.4.1. Définition .................................................................................................................. 41 2.4.2. Propriétés physico-chimiques ................................................................................... 42 2.4.2.1. Propriétés physiques ............................................................................................. 42 2.4.2.2. Propriétés chimiques ............................................................................................. 43 2.4.3. Mécanisme d’action du formaldéhyde ....................................................................... 43 2.4.4. Métabolisme et toxicocinétique ................................................................................ 44 a. Voies d’absorption .............................................................................................. 44 b. Métabolisation et distribution ............................................................................. 45 c. Elimination ......................................................................................................... 452.4.4.1. Effet toxique ........................................................................................................ 46 2.4.4.2. Toxicité aigue ....................................................................................................... 46 a. Effet irritant et allergisant .................................................................................. 46 2.4.4.3. Toxicité chronique ................................................................................................ 47 a. Effets neurologiques ........................................................................................... 48 b. Effet sensibilisant et allergisant ........................................................................... 48 c. Cancérogénicité ................................................................................................... 48 2.4.5. Les principales sources de formaldéhyde .................................................................. 48 2.4.6. Domaines d’utilisation ............................................................................................... 49 a. Exposition professionnelle .................................................................................. 49 b. Exposition environnementale .............................................................................. 50 c. Exposition domestique ....................................................................................... 51 Partie pratique Matériels et méthodes 1.Objectif ....................................................................................................................... 54 2.Matériel ....................................................................................................................... 54 2.1. Matériel végétal .......................................................................................................... 54 2.2. Matériels chimiques ...................................................................................................... 54 2.3. Matériel biologique ..................................................................................................... 54 3. Méthodologie ............................................................................................................... 55 3.1. Préparation de l’extrait aqueux de pimpinella anisum L .............................................. 55 3.2. Extraction de l’huile essentielle d’anis vert ............................................................. 55 3.3. Calcul du rendement ................................................................................................... 55 3.4. Analyse quantitative (CPG /SM) .................................................................................. 55 3.4.1. Principe ..................................................................................................................... 55 3.4.2. Mode opératoire ........................................................................................................ 56 4. Analyse qualitative ...................................................................................................... 56 4.1. Etude phytochimique ................................................................................................. 56 4.1.1. Les tannins ................................................................................................................ 57 4.1.2. Les flavonoïdes ......................................................................................................... 57 4.1.3. Les anthocyanes ........................................................................................................ 57 4.1.4. Les coumarines .......................................................................................................... 57 4.1.5. Les alcaloïdes ............................................................................................................ 57 4.1.6. Stérols et triterpènes .................................................................................................. 584.1.7. Les saponosides ......................................................................................................... 58 4.1.8. Les composés réducteurs ........................................................................................... 59 4.1.9. L’amidon .................................................................................................................. 59 5. Répartition des groupes .................................................................................................. 59 5.1.L’exposition à l’imidaclopride ....................................................................................... 59 5.2. L’exposition au Formaldéhyde .................................................................................... 59 6. Evolution du poids corporel ........................................................................................... 61 7. Les tests neurocomportementaux ............................................................................... 61 7.1. Test de la nage forcée .................................................................................................. 61 7.2. Test de l’open field ...................................................................................................... 62 7.3. Labyrinthe de Barnes .................................................................................................. 63 7.4. La piscine de Morris (Labyrinthe aquatique) ................................................................ 64 8. Prélèvement sanguin et évaluation des poids des organes ............................................... 65 9. Evaluation des paramètres biochimiques et hématologiques ........................................... 66 9.1. Dosage des paramètres hématologiques ....................................................................... 66 9.2. Dosage des paramètres biochimiques ......................................................................... 66 9.2.1. Glucose Gluc –DH FS ................................................................................................ 66 9.2.2. Urée .......................................................................................................................... 66 9.2.3. Créatinine PAP (Enzymatic method) .......................................................................... 67 9.2.4. Détermination quantitative d’aspartate amino tranférase TGO (ASAT)....................... 67 9.2.5. Détermination quantitative d’alanine amino transférase TGP(ALAT) ......................... 67 9.2.6. Phosphatase alcaline .................................................................................................. 68 10.Dosage des deux pesticides au niveau hépatique et cérébral ....................................... 68 11.Expression et analyse statistique des résultats ............................................................ 69 12.Etude histologique .................................................................................................. 69 13.Fixation ...................................................................................................................... 69 14.Traitement des tissus ................................................................................................. 69 15.Inclusion et confection des blocs ............................................................................... 70 16.Confection des coupes ............................................................................................... 71 17.Coloration ................................................................................................................. 72 18.Lecture des lames ..................................................................................................... 72 Résultats et interprétation 1. Détermination du rendement .......................................................................................... 74 2. Analyse phytochimique ................................................................................................... 743. Détermination de la composition chimique d’huile essentielle de Pimpinella anisum par CPG/MS……………........................................................................................................... 75 4. Effet des deux pesticides sur la croissance pondérale des rats .......................................... 75 4.1. Différence entre poids initial et final chez les différents groupes expérimentaux .......... 76 4.2. Gains de poids .............................................................................................................. 77 5. Les tests neurocomportementaux .................................................................................. 79 5.1. Comportement de type dépressif (Test de la nage forcée) ............................................. 79 5.2. Evaluation du comportement d’exploration : Test d’Open Field ................................... 81 4.3. Apprentissage spatial .................................................................................................... 83 4.3.1. Labyrinthe de Barnes ............................................................................................... 83 4.3.2. La piscine de Morris ................................................................................................. 86 6. Le dosage de la glycémie ................................................................................................ 89 7. Estimation du poids relatif des organes des deux pesticides ............................................. 91 7.1.Évaluation du poids cérébral ...................................................................................... 91 7.2.Évaluation du poids du foie ....................................................................................... 92 7.3.Évaluation du poids rénal .......................................................................................... 94 8.Fonction rénale .......................................................................................................... 95 8.1. Dosage de l’urée et créatinine ...................................................................................... 95 8.2. L’effet de l’imidaclopride et formaldéhyde sur l’architecture structurale des reins ....... 98 9. ... Exploration de la fonction hépatique …………………………………………………101 9.1. Le dosage des enzymes hépatiques (ASAT, ALAT, PAL)…………………………….105 9.2. L’effet de l’imidaclopride et formaldéhyde sur l’architecture structurale du foie ........ 102 10. Les paramètres hématologiques ................................................................................. 108 11. Exploration de la fonction cérébrale ............................................................................ 115 11.1. L’effet de l’IMD et du FA sur l’architecture structurale du cerveau ....................... 115 11.2. Résultats du dosage des deux pesticides au niveau cérébral et hépatique par (HPLC) .118 Discussion......................................................................................................................... 120 Conclusion ....................................................................................................................... 148 Références bibliographiques ……………………………………………………………..151 |
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